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高效液相色譜儀使用方法通用版

發布日期:2017-12-14 14:56:20

 

1、開機設定參數(檢測波長、流速),更換所需流動相,檢查色譜柱是否正確。
2、排液置換管路中流動相,沖洗進樣閥,洗好進樣針。
3、沖洗色譜柱進行平衡,其間可提前進行樣品的處理,樣品信息的注冊。
4、平衡好以后進空白試驗,排除系統污染。
5、柱子穩定好以后進樣,等待運行結束(其間清洗進樣針),積分計算,出具報告。

詳細操作步驟如下:

1、 開機操作:
(1)、打開電源,用Harb相連接時,注意Harb電源,打開計算機,打開Bootp Server(一般啟動時已打開);
(2)、自上而下打開個組件電源,Bootp Server里顯示有信號時(有六行字符),打開工作站(先打開On line);
(3)、打開沖洗泵頭的10%異丙醇溶液的開關(需用針捅抽),控制流量大小,以能流出的最小流量為準;
(4)、注意各流動相所剩溶液的容積設定,若設定的容積低于最低限會自動停泵,注意洗泵溶液的體積,及時加液;
(5)、使用過程中要經常觀察儀器工作狀態,及時正確處理各種突發事件。
2、 先以所用流動相沖洗系統一定時間(如所用流動相為含鹽流動相,必須先用水沖洗20分鐘以上再換上含鹽流動相),正式進樣分析前30min 左右開啟D燈或W燈,以延長燈的使用壽命;
3、 建立色譜操作方法,注意保存為自己命名的Method,勿覆蓋或刪除他人的方法及實驗結果;
4、 使用手動進樣器進樣時,在進樣前和進樣后都需用洗針液洗凈進樣針筒,洗針液一般選擇與樣品液一致的溶劑,進樣前必須用樣品液清洗進樣針筒3遍以上,并排除針筒中的氣泡;
5、 溶劑瓶中的沙芯過濾頭容易破碎,在更換流動相時注意保護,當發現過濾頭變臟或長菌時,不可用超聲洗滌,可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗滌;
6、 實驗結束后,一般先用水或低濃度甲醇水溶液沖洗整個管路30分鐘以上,再用甲醇沖洗。沖洗過程中關閉D燈、W燈;
7、 關機時,先關閉泵、檢測器等,再關閉工作站,然后關機,最后自下而上關閉色譜儀各組件,關閉洗泵溶液的開關;
8、 使用者須認真履行儀器使用登記制度,不要擅自拆卸儀器。

流動相:
1、 流動相應選用色譜純試劑、高純水或雙蒸水,酸堿液及緩沖液需經過濾后使用,過濾時注意區分水系膜和油系膜的使用范圍;
2、 水相流動相需經常更換(一般不超過2天),防止長菌變質;
3、 使用雙泵時,A、B、C、D四相中,若所用流動相中有含鹽流動相,則A、D(進液口位于混合器下方)放置含鹽流動相,B、C(進液口位于混合器上方)放置不含鹽流動相;
A、B、C、D四個儲液器中其中一個為棕色瓶,用于存放水相流動相。
樣品:
1、 采用過濾或離心方法處理樣品,確保樣品中不含固體顆粒;
2、 用流動相或比流動相弱(若為反相柱,則極性比流動相大;若為正相柱,則極性比流動相?。┑娜軇┲苽錁悠啡芤?,盡量用流動相制備樣品液;
手動進樣時,進樣量盡量小,使用定量管定量時,進樣體積應為定量管的3~5倍;
色譜柱:
1、 使用前仔細閱讀色譜柱附帶的說明書,注意適用范圍,如pH值范圍、流動相類型等;
2、 使用符合要求的流動相;
3、 使用保護柱;
4、 如所用流動相為含鹽流動相,反相色譜柱使用后,先用水或低濃度甲醇水(如5%甲醇水溶液),再用甲醇沖洗。
5、 色譜柱在不使用時,應用甲醇沖洗,取下后緊密封閉兩端保存;
6、 不要高壓沖洗柱子;
7、 不要在高溫下長時間使用硅膠鍵合相色譜柱;

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